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[品控交流] 霉菌毒素檢測方法綜述

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    發(fā)表于 2015-6-5 09:35:09 |只看該作者 |倒序瀏覽
     
      摘要: 由于產(chǎn)生毒素的霉菌無處不在,以及我們對大多數(shù)有利于霉菌生長和霉菌毒素產(chǎn)生的條件控制不力,造成食品和飼料的霉菌毒素污染問題越來越成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可忽視的重大難題。在各種農(nóng)產(chǎn)品上生長著的各種各樣的霉菌 ...

      由于產(chǎn)生毒素的霉菌無處不在,以及我們對大多數(shù)有利于霉菌生長和霉菌毒素產(chǎn)生的條件控制不力,造成食品和飼料的霉菌毒素污染問題越來越成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可忽視的重大難題。在各種農(nóng)產(chǎn)品上生長著的各種各樣的霉菌,這些霉菌都能產(chǎn)生霉菌毒素,霉菌毒素是有毒的化合物,有些甚至是致癌的。霉菌毒素有很多種(CAST,2003),包括黃曲霉毒素,主要是黃曲霉毒素B1和M1(Aflatoxins,F(xiàn)B1、FM1);赭(棕)曲霉毒素A(OchratoxinA,OA);雜色(柄)曲霉毒素(Terigmatocystin);展青霉素(Patulin,PTL);玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F-2));串珠鐮刀菌素(Moniliformin,MF),三硝基丙酸以及屬于單端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)的T-2毒素(T-2toxin,T-2);脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)(Deoxynivalenol,DON);二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol,DAS)等。

      聯(lián)合國糧農(nóng)組織在近期的報道中指出,全世界至少99個國家,占世界人口的87%,針對糧食和飼料的霉菌毒素污染問題都有相關(guān)的規(guī)定。在未來的幾年里,與不斷變化的全球氣候有關(guān)的氣象突發(fā)事件的增多將進一步向我們提出挑戰(zhàn)。霉菌毒素污染給食品企業(yè)、糧油加工企業(yè)、畜禽養(yǎng)殖場以及飼料的加工企業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。

      目前霉菌毒素檢測常用的方法如下幾種:

      一、  薄層層析法:

      TLC法是針對不同的樣品,用適宜的提取溶劑將霉菌毒素從樣品中提取出來,經(jīng)柱層析凈化,再在薄層板上層析展開、分離,利用霉菌毒素的熒光性,根據(jù)熒光斑點的強弱與標準比較測定其最低含量。TLC法樣品前處理繁瑣,且提取和凈化效果不夠理想,提取液中雜質(zhì)較多,在展開時影響斑點的熒光強度。

      二、色譜法:

      色譜法,包括薄層色譜、氣相色譜、液相色譜等,一直是最重要的霉菌毒素的化學(xué)分析方法,F(xiàn)在比較普遍的霉菌毒素的分析方法還是液相色譜法,包括液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。該法快速而準確,但需要昂貴的儀器設(shè)備,僅限于專業(yè)檢測機構(gòu)獲得科研和調(diào)查分析、監(jiān)測使用,未能在企業(yè)及基層廣泛推廣使用,而且其結(jié)果的滯后效應(yīng)大大降低了對生產(chǎn)實際的指導(dǎo)效果。

      三、免疫化學(xué)檢測法: (膠體金免疫層析法,酶聯(lián)免疫吸附法)

      免疫學(xué)檢測方法是基于抗體與抗原或半抗原之間的選擇性反應(yīng)而建立起來的一種生物化學(xué)分析法。通常具有高的選擇性和很低的檢出限,廣泛用于各種抗原、半抗或抗體的測定,一般可分為熒光免疫法、發(fā)光免疫法、免疫法及電化學(xué)免疫法等非放射免疫法和放射免疫法,其中在飼料霉菌毒素檢測中應(yīng)用較廣的主要是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和膠體金免疫層析法。

      免疫學(xué)檢測方法由于其快速、靈敏、準確、可定量、操作簡便、無需貴重儀器設(shè)備,且對樣品純度要求不高等特性,特別適用于飼料廠、糧油/食品加工廠、養(yǎng)殖場等企業(yè)進行原料或成品的檢測以及工商質(zhì)監(jiān)部門現(xiàn)場檢測。

      該類方法有以下特點:

      1) 靈敏度高

      2) 干擾。嚎贵w抗原的免疫反應(yīng)特異性很強,結(jié)構(gòu)類似物、熒光物質(zhì)、有色物質(zhì)對檢測的干擾很小。

      3) 操作簡便快捷:由于特異性強,簡化了樣品的預(yù)處理和提取純化過程,同時操作步驟也非常簡便,測定時間也短。

      4) 安全性高,污染少,成本低廉:不需要昂貴的測定儀器,所用試劑也相對較少,特別是因為靈敏度高,毒素標準品的濃度可以很低,減少了對檢測人員和環(huán)境的潛在危害和污染。


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      以上兩表對比了各種方法的優(yōu)缺點以及各種單位最實用的檢測方法分析,希望能對關(guān)注霉菌毒素的企業(yè)和單位有所幫助,但是同行業(yè)也可以從經(jīng)濟成本和樣品不同要求出發(fā)也有可以找到最適合自己企業(yè)適用的檢測方法。

      下表中針對食品和飼料行業(yè)中不同的原料推薦了相應(yīng)的初篩方法:
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      內(nèi)容來源:畜牧人網(wǎng)站

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