本帖最后由 一片云 于 2016-7-22 16:10 編輯
角蛋白酶DP100與HFMR技術(shù)對(duì)鯽魚配方中替代魚粉效果研究 陶青燕 博士 諾偉司國際公司
摘要：本試驗(yàn)研究了角蛋白酶產(chǎn)品 CIBENZA®DP100（DP100）對(duì)異育銀鯽(Carassiusauratus gibeilo) 攝食低魚粉低蛋白飼料時(shí)生長性能和體內(nèi)大豆抗原蛋白的消除作用，評(píng)估了其在異育銀鯽飼料中的成本節(jié)約效應(yīng)。角蛋白酶是一種新型的飼料用酶，在我國可以應(yīng)用于飼料的角蛋白酶產(chǎn)品首次出現(xiàn)在2013年的飼料添加劑目錄中，并在分類上有別與普通的飼料用蛋白酶。角蛋白酶實(shí)際上具有二硫鍵還原酶和多肽水解酶的活性，也就是說角蛋白酶除了能分解普通蛋白酶能分解的蛋白質(zhì)外，還能通過降解二硫鍵，極大的提高動(dòng)物對(duì)那些自身和普通蛋白酶不能消化的蛋白質(zhì)的利用，從而擴(kuò)大了魚類對(duì)于飼料蛋白質(zhì)的可利用范圍。本試驗(yàn)共設(shè)計(jì)7種飼料，包括高魚粉高蛋白對(duì)照組（9%的魚粉，HFC，蛋白水平34%），低魚粉低蛋白對(duì)照組（4.5%的魚粉，LPC，蛋白水平32.5%），在LPC的基礎(chǔ)上分別添加DP100 300、400、500、600 mg/kg以 及魚粉綜合替代添加劑制成另外5種飼料(LP300、LP400、LP500、LP600和HFMR）。挑選平均重為72.5±0.01g的 異育銀鯽560尾 ，隨機(jī)分成7組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)20尾魚 ，養(yǎng)殖56天。研究發(fā)現(xiàn)同低魚粉低蛋白LPC組相比，飼料中添加300g的DP100可提高鯽魚的增重率14.8%,改善飼料利用率9.7%，同高魚粉高蛋白組HPC相比，其生產(chǎn)性能相當(dāng)，但可降低配方成本421元/噸。在本試驗(yàn)條件下，添加超過300克的DP100并不能進(jìn)一步改善鯽魚的生產(chǎn)成績。400g/T或更高的DP100添加量可顯著降低鯽魚糞便中大豆球蛋白和β-伴球蛋白的含量( P<0.05）。在添加DP100的同時(shí)應(yīng)用HFMR技術(shù)進(jìn)行魚粉綜合替代可以在降低蛋白1.5%和成本306 元/噸的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高鯽魚生產(chǎn)性能5%左右。
前言
體外試驗(yàn)及畜禽試驗(yàn)研究表明 DP100 能夠有效分解包括羽毛粉在內(nèi)的大多數(shù)動(dòng)植物來源的蛋白質(zhì)，其分解活性要強(qiáng)于大多數(shù)已知的角蛋白酶(Shihand Wang, 2006)。魚粉作為昂貴的動(dòng)物蛋白源，其高消化率的蛋白質(zhì)品質(zhì)是其優(yōu)良特性的重要特征之一，但成本高。DP100 有可能通過提高飼料蛋白的利用率而降低魚類對(duì)于魚粉的依賴。蛋白質(zhì)/ 能量消化率下降，腸道受損，氨基酸不平衡，礦物元素利用率低是替代魚粉配方的主要缺陷。其中熱穩(wěn)定的大豆抗原蛋白是導(dǎo)致魚類應(yīng)用大豆制品腸道損傷的主要抗?fàn)I養(yǎng)因子之一。HFMR( 魚粉綜合替代 ) 技術(shù)是以營養(yǎng)素平衡和建康維護(hù)為配方設(shè)計(jì)思想的魚粉替代技術(shù)，旨在通過提高魚體自身的消化力以彌補(bǔ)魚粉減少后原料消化率下降的事實(shí)。將 DP100 作為 HFMR 技術(shù)的組成元件之一，有望進(jìn)一步提高魚粉綜合替代配方的生產(chǎn)表現(xiàn)。
一、材料和方法
1.1 試驗(yàn)飼料：
本試驗(yàn)共設(shè)計(jì)7種飼料來評(píng)估DP100在異育銀鯽低魚粉低蛋白飼料中的應(yīng)用價(jià)值。其中高魚粉對(duì)照組的營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)參考現(xiàn)有商業(yè)配方進(jìn)行配制（9%的魚粉，HFC，其它以46%豆粕，200型菜粕以及棉粕為主）蛋白含量為正常的34%，脂肪含量8%；低蛋白對(duì)照組（降低一半的魚粉，其它餅粕類添加量不變并適當(dāng)添加水解羽毛粉作為替代蛋白源，LPC）蛋白含量32.5%；以LPC為基礎(chǔ)飼料，分別添加 DP100、300、400、500 和 600 mg/kg，形成另外4種試驗(yàn)飼料，分別命名為 LP300、LP400、LP500 和 LP600；根據(jù) Novus 研發(fā)的 Matrix Value 軟件計(jì)算該配方中 DP100 的潛在營養(yǎng)價(jià)值，在帶入 DP100 潛在營養(yǎng)價(jià)值時(shí) LP500 處理組的營養(yǎng)水平與 HFC 組相當(dāng)。在 LPC 基礎(chǔ)上，添加魚粉綜合替代添加劑（詳見表 1），形成魚粉綜合替代組（HFMR）飼料。各試驗(yàn)飼料均添加0.1% 的 Y2O3 作為指示劑，飼料加工采用環(huán)模蒸汽質(zhì)粒工藝，加工好的飼料置于 -20℃保存?zhèn)溆�。飼料配方及營養(yǎng)物質(zhì)組成見表 1。
1.2 養(yǎng)殖試驗(yàn)和樣品采集：
養(yǎng)殖試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評(píng)價(jià)基地（北京，南口）的循環(huán)水系統(tǒng)中進(jìn)行。所用靶動(dòng)物為異育銀鯽。試驗(yàn)開始前禁食24h，挑選平均重為72.5±0.01g的健康鯽魚560尾，隨機(jī)分成7組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)20尾魚，每天表觀飽食投喂3次（08:00，12:00，16:00）。每天觀察魚的健康狀況，記錄死亡情況，統(tǒng)計(jì)成活率，養(yǎng)殖周期56天。試驗(yàn)期間水溫23-25℃，PH值在7.4左右，溶氧＞7.0 mg/L，氨氮＜0.5mg/L，每天光照12h。在飼喂試驗(yàn)飼料一周后開始采用虹吸法收集糞便，選取攝食后1小時(shí)內(nèi)包膜完整的糞便-20℃保存?zhèn)溆茫靡詼y(cè)定其中殘留的大豆球蛋白和β-伴球蛋白的含量。在56天養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每桶試驗(yàn)魚稱總重；每桶取3尾單獨(dú)稱重并量體長，同時(shí)解剖分離內(nèi)臟和肝臟，分別稱重，以計(jì)算生長性能和形體指標(biāo)。
1.3 統(tǒng)計(jì)分析：
試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。采用STATISTICA 6.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），差異顯著者進(jìn)行Duncan 's多重比較，顯著水平以 P<0.05 計(jì)。
二、結(jié)果與討論
2.1 生產(chǎn)性能：
低魚粉低蛋白飼料中添加DP100對(duì)異育銀鯽生產(chǎn)性能的影響見表2。結(jié)果顯示，LPC組生產(chǎn)性能數(shù)據(jù)為最低（WGR平均為64.49%），HFC組WGR 為72.67%， 添加DP100各組WGR值為72.17~74.73%，HFMR組為最高達(dá)到76.65%。同低魚粉低蛋白組LPC相比，飼料中添加300g的DP100可提高鯽魚的增重率14.8%,改善飼料利用率9.7%。不同飼料處理對(duì)異育銀鯽的CF、HSI 和 VSI存在顯著影響：LP400組的CF顯著高于HFC、LPC、LP300 和 LP500 組（P<0.05），其它各處理組間無顯著差異（P>0.05）；HFMR 組的HSI低于LPC 和LP500 組（P<0.05），其它各處理組間無顯著差異（P>0.05）；FR 組的VSI顯著高于LPC和 LP500 組（P<0.05），LP500組顯著低于 LP400 組（P<0.05），其它各處理組間無顯著差異（P>0.05）。從生產(chǎn)性能的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，添加 DP100 能夠提高低魚粉低蛋白配方的生產(chǎn)成績，達(dá)到與高魚粉高蛋白相當(dāng)?shù)慕Y(jié)果。這是由于DP100具有提高飼料原料蛋白消化率的作用，使高低蛋白配方在魚體內(nèi)釋放出相同的可消化養(yǎng)分。用DP100的Matrix Value 軟件得到的DP100潛在營養(yǎng)價(jià)值去平衡低魚粉低蛋白配方，可以有效指導(dǎo)降低魚粉或蛋白的幅度，而對(duì)魚體的生長速度沒有影響。在300g的DP100的基礎(chǔ)上進(jìn)一步增加DP100的添加量并不能進(jìn)一步提高異育銀鯽的生產(chǎn)性能，表明在該制粒溫度下，300g的DP100就可充分發(fā)揮其效能，這可能與配方中的底物含量有關(guān)。相對(duì)于生長速度，LP300-LP600的餌料系數(shù)略高于HFC組，但差異均不顯著。其原因與原料脂肪含量變異和能量估計(jì)出入較大有關(guān)。從表 1 的飼料成分分析結(jié)果可以看出，雖然配方設(shè)計(jì)值相同，但LP300-LP600各處理組的配方總能 均比HFC組低400-500KJ/Kg， 而DP100的 Matrix Value 軟件得到的500g DP100 在該配方中可釋放的能量約為 200 KJ/Kg，這可能是導(dǎo)致餌料系數(shù)略高的主要原因。而 HFMR 處理組，即時(shí)在配方總能偏低的情況下仍能保持與HFC組相當(dāng)?shù)酿D料系數(shù)，表明HFMR組的中的其它的添加物有進(jìn)一步提高飼料有效能釋放的功能。
2.2 大豆抗原蛋白的消除作用：
添加不同劑量的DP100均可明顯降低異育銀鯽糞便中殘留的大豆球蛋白和β-伴球蛋白的含量（表 3）。其中添加400g的 DP100 可 顯 著 降 低 異 育 銀鯽糞便中49.1%（P<0.05）的大豆球蛋白和 57.2%（P<0.05）β-伴球蛋白含量。而添加500g和 600gDP100后糞便中殘留的大豆球蛋白和β- 伴球蛋白的含量則已低于或接近檢測(cè)限。在各配方中均含有250 公斤/噸去皮豆粕的基礎(chǔ)上，高魚粉高蛋白HFC組糞便中含有最高的大豆球蛋白和β-伴球蛋白的含量。這些經(jīng)糞便排除的抗原蛋白表明魚體自身蛋白酶類不能有效降解它們。已知大豆中的大豆球蛋白和β-伴球蛋白具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性，常規(guī)的加熱等處理方法不能使其充分的滅活，因此許多大豆制品中仍然存在具有免疫活性的大豆球蛋白和β-伴球蛋白，飼喂后可引起魚類腸道的過敏反應(yīng)，從而導(dǎo)致消化力和抗病力的下降。大豆中存在的抗原蛋白一直是大豆蛋白替代魚粉的關(guān)鍵制約因素。DP100對(duì)大豆抗原的有效降解不但可降低抗原蛋白對(duì)腸道的損傷作用還可以將這些蛋白質(zhì)有效分解吸收，從而為大豆蛋白對(duì)魚粉的更高比列替代提供了全新的解決思路。
三、小結(jié)
同低魚粉低蛋白組（LPC）相比，飼料中添加300g DP100 可提高鯽魚的增重率14.8%, 改善飼料利用率9.7%，同高魚粉高蛋白組（HPC）相比 , 其生產(chǎn)性能相當(dāng)，并可降低成本421 元/ 噸。在本試驗(yàn)條件下，添加超過300克的DP100 并不能進(jìn)一步改善鯽魚的生產(chǎn)成績。400g/T或更高的DP100添加量可以顯著降低鯽魚糞便中大豆球蛋白和β-伴球蛋白的含量。在添加DP100的同時(shí)應(yīng)用 HFMR 技術(shù)進(jìn)行魚粉綜合替代可以在降低蛋白1.5%和成本306元/ 噸的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高鯽魚生產(chǎn)性能5%左右。
參考文獻(xiàn)（略）
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[復(fù)制鏈接]
狗仔卡
發(fā)表于 2016-7-22 15:52:46
顯身卡
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