【推薦】以下幾個步驟，讓你秒變芽胞桿菌產(chǎn)品識別達(dá)人

小通仔

    芽胞桿菌在不良環(huán)境中可產(chǎn)生特有孢子結(jié)構(gòu)以對抗外界帶來的致命傷害，因而芽胞桿菌可耐受飼料制粒中高溫、高壓、高濕等不良因子，且產(chǎn)生的益生效益顯著，近年來已廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域。伴隨芽胞桿菌發(fā)酵工藝日趨成熟，生產(chǎn)成本進(jìn)一步降低，使得芽胞桿菌在各個領(lǐng)域應(yīng)用空間巨大。但由于技術(shù)水平與檢測能力受限，傳統(tǒng)檢測方法最快需2-3天，市場缺乏相應(yīng)的檢測方法。市場產(chǎn)品普遍存在產(chǎn)品以次充好，產(chǎn)品實(shí)際活菌數(shù)與標(biāo)識差異較大等現(xiàn)象。很多廠家、分子公司與經(jīng)銷商無法快速辨別產(chǎn)品檔次和優(yōu)劣，錯把稀釋產(chǎn)品當(dāng)原菌粉，把低活菌數(shù)產(chǎn)品當(dāng)高活菌數(shù)產(chǎn)品購買，進(jìn)而影響自身產(chǎn)品生產(chǎn)銷售。

   

    成都水產(chǎn)科技有限公司微生物研究室通過經(jīng)驗(yàn)摸索，建立了一條 “望 、聞 、察 、溶 、計”5字方針的芽胞桿菌產(chǎn)品純度及活菌數(shù)級別快速分辯流程，最快1h內(nèi)得到初步結(jié)果，具體判定方法如下：

1、“望”與“聞”：取2g產(chǎn)品于稱量紙上均勻攤開，分別觀察產(chǎn)品顏色及氣味。一般情況下芽胞桿菌原菌粉產(chǎn)品呈黃色至深棕色，且原粉細(xì)膩、基本無白色顆粒感；有直接發(fā)酵后的腥臭味，無米糠、麩皮、輕質(zhì)碳酸鈣、次粉、滑石粉等載體原料及香精的氣味，如圖1所示。

2、“察”：取少量產(chǎn)品菌粉于載玻片上均勻攤開，于40倍顯微鏡下觀察。一般情況下原菌粉呈現(xiàn)形態(tài)均一的菌團(tuán)狀，基本無反光晶體或片狀纖維結(jié)構(gòu)，如圖2所示。

3、“溶”：準(zhǔn)確稱取1g樣品至99mL滅菌水中，于20℃、180r/min充分勻質(zhì)20min。一般情況下原菌粉產(chǎn)品溶解后溶液均一性好，瓶底沉淀搖晃易分散且均一。稀釋后的產(chǎn)品溶解后有明顯黑色、淺白色或淺棕色顆粒狀沉淀物質(zhì)，瓶壁有顆粒狀物質(zhì)附著，如圖3所示。

4、“計”：樣品預(yù)處理參照上述第4點(diǎn)進(jìn)行，取100 μL勻質(zhì)液至900 μL無菌水中振蕩均勻，取20μL稀釋液涂布于干凈載玻片上（面積1平方厘米，約為大拇指蓋大小），火焰上方固定、結(jié)晶紫染色，100倍顯微鏡下隨機(jī)統(tǒng)計3個視野下芽胞數(shù)量，并求平均值。當(dāng)芽胞數(shù)<10個，產(chǎn)品芽胞桿菌小于等于每克10億，當(dāng)芽胞數(shù)介于10-120個，產(chǎn)品芽胞桿菌數(shù)約每克100億；當(dāng)芽胞數(shù)介于120~200，產(chǎn)品芽胞桿菌數(shù)約每克1000億。

小結(jié)：芽胞桿菌原菌粉具有芽胞菌株發(fā)酵后特有腥臭味、產(chǎn)品顏色為黃色至深棕色、質(zhì)感細(xì)膩、基本無白色顆粒感，產(chǎn)品溶解后溶液均一性好、底部沉淀搖晃易分散，40倍顯微鏡下菌粉形態(tài)均一，100倍顯微鏡下芽胞數(shù)介于120—200個。

芽胞桿菌稀釋產(chǎn)品具有不同程度的香味（常見為麩皮、米糠香味）、產(chǎn)品顏色為淺白色或淡黃色、質(zhì)感較為粗糙甚至出現(xiàn)肉眼可見的白色顆粒，產(chǎn)品溶解后底部可能會出現(xiàn)黑色、淺白色或淺棕色顆粒狀沉淀物質(zhì)，部分產(chǎn)品瓶壁會有顆粒狀物質(zhì)附著，40倍顯微鏡下可見反光晶體或片狀纖維結(jié)構(gòu)，100倍顯微鏡下芽胞數(shù)介于10-120個或基本觀察不到芽胞。

來源：通威水產(chǎn)科技頻道

作者：茍小蘭、趙桂仙、蘇艷秋、張良