原文作者:LocTran、D.V.Lightner等 翻譯:中國(guó)水產(chǎn)頻道通訊員 胡路怡
概述: 自2009年以來,早期死亡綜合癥(EMS),又稱急性肝胰腺壞死綜合癥(AHPNS)給亞洲的對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成了前所未有的沖擊。除了大規(guī)模減產(chǎn)外,該疾病還帶來了諸多負(fù)面問題,例如:對(duì)蝦養(yǎng)殖就業(yè)問題、社會(huì)福利問題、對(duì)蝦供求問題和全球?qū)ξr總體價(jià)格問題等等。2013年5月,美國(guó)亞利桑那大學(xué)水產(chǎn)病理實(shí)驗(yàn)室(UAZ-APL)定義其病原為副溶血弧菌Vibrioparahaemolyticus的特異菌株,該菌株能夠產(chǎn)生毒素并誘導(dǎo)健康對(duì)蝦致;但是,此病原會(huì)在冰凍和解凍的過程中失活;感染AHPNS病原的對(duì)蝦不會(huì)對(duì)人類健康造成負(fù)面影響。 EMS/AHPNS病理重溫 急性肝胰腺壞死綜合癥爆發(fā)于投苗后45天內(nèi),目前作用于兩個(gè)對(duì)蝦養(yǎng)殖品種:南美白對(duì)蝦Litopenaeusvannamei和斑節(jié)對(duì)蝦Penaeusmonodon。感染AHPNS的對(duì)蝦肝胰腺白化并萎縮,嚴(yán)重時(shí)可以觀察到因黑色素沉積而產(chǎn)生的黑斑或黑色條紋,對(duì)蝦死亡率可在數(shù)天內(nèi)達(dá)到100%。 組織病理學(xué)顯示,AHPNS的感染呈現(xiàn)出從基部到末梢的肝胰腺退化和功能障礙,部分細(xì)胞從壞死的組織上脫落后進(jìn)入肝胰腺小管腔和腸道內(nèi)。在感染的后期,肝胰腺內(nèi)出現(xiàn)滲入的血細(xì)胞,伴隨著繼發(fā)性細(xì)菌定植其中,引起上皮細(xì)胞的大量壞死脫落。此種特殊的病變表明肝胰腺的壞死與毒素介導(dǎo)有關(guān)。 前期的研究 2011年至2012年,亞利桑那大學(xué)水產(chǎn)病理實(shí)驗(yàn)室曾試圖通過兩方面的研究來尋找AHPNS的病因。第一,在水環(huán)境、底質(zhì)、藻類、飼料和殺蟲劑中尋找可疑的毒素;第二,以冰凍的患病對(duì)蝦樣品做人工感染試驗(yàn)。結(jié)論表明,此兩種方法均無(wú)法復(fù)制疾病。 2012年中后期,在越南的研究實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),通過投喂非冰凍的患病死亡對(duì)蝦,同患病對(duì)蝦混養(yǎng),以及浸泡從患病對(duì)蝦消化道中分離出的混合菌株的方法,成功在健康的對(duì)蝦試驗(yàn)池塘復(fù)制出了AHPNS癥狀。這些混合菌株的樣本也被送回亞利桑那大學(xué)做進(jìn)一步的分析。 傳染性研究 在亞利桑那實(shí)驗(yàn)室的傳染性研究中,兩種感染方法被依次采用:浸泡法和反向灌胃法(Reversegavage)。所謂的“反向灌胃”,指將病原提取物從肝門反向注射到肝胰腺中。實(shí)驗(yàn)分為三個(gè)步驟:1.浸泡混合菌株的人工感染實(shí)驗(yàn);2.從混合菌株中分離出多個(gè)純菌株,依次浸泡感染后篩選純病原菌株;3.對(duì)能夠誘導(dǎo)AHPNS的純病原進(jìn)行生物測(cè)定和反向灌胃試驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1.浸泡混合菌株可造成健康對(duì)蝦大量死亡并復(fù)制出與AHPNS相同的癥狀;2.浸泡從混合菌株中分離出的優(yōu)勢(shì)純菌株也可以復(fù)制出與AHPNS相同的癥狀;3.該菌株可在對(duì)蝦體內(nèi)復(fù)制,連續(xù)感染兩代對(duì)蝦并獲得相同癥狀。由此證實(shí)了AHPNS是由傳染性病原引起的。 有趣的是,從接種了純病原的培養(yǎng)基中提取的“無(wú)菌”上清液,通過反向灌胃法,可使健康對(duì)蝦獲得與AHPNS相同的病理特征。此現(xiàn)象對(duì)先前的“毒素介導(dǎo)”假設(shè)給予了佐證。利用生物化學(xué)和分子生物學(xué)手段,亞利桑那實(shí)驗(yàn)室把AHPNS的病原定義為“副溶血弧菌Vibrioparahaemolyticus”的一種特異菌株。 人類健康和生物安全提示 部分副溶血弧菌產(chǎn)生的毒素具有一定的熱穩(wěn)定性,人類誤食未煮熟的海鮮可能得腸胃疾病。幸運(yùn)的是,AHPNS的病原副溶血弧菌不會(huì)產(chǎn)生熱穩(wěn)定毒素。 由于AHPNS是一種傳染性疾病,對(duì)于養(yǎng)殖業(yè)而言,如何控制疾病的傳播是當(dāng)務(wù)之急。亞利桑那大學(xué)認(rèn)為,鮮活對(duì)蝦比冰凍對(duì)蝦具有更高的傳染性,因此,在AHPNS的快速檢測(cè)方法完善之前,從感染地區(qū)運(yùn)輸出鮮活對(duì)蝦的風(fēng)險(xiǎn)不容低估。AHPNS病原主要集中在肝胰腺,去頭對(duì)蝦相比整蝦在運(yùn)輸過程中的風(fēng)險(xiǎn)要低得多。 所有證據(jù)表明,對(duì)蝦在冰凍和解凍的過程中,AHPNS的病原已經(jīng)失去生物活性。因此,對(duì)于進(jìn)口國(guó)來說,冰凍的商品蝦不會(huì)帶來太大的疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)。 未來研究方向 未來的研究將闡述“噬菌體”在參與弧菌毒素釋放和增強(qiáng)致病力中的作用。通過酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)診斷等方法,AHPNS病原體毒素和相關(guān)基因?qū)⒆鳛橹饕治瞿繕?biāo)。同時(shí),多種疾病探測(cè)和控制方法也在逐步完善中。 關(guān)鍵詞:EMS AHPNS 南美白對(duì)蝦 D.V.Lightner 弧菌毒素
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