石斑魚受精卵怎么洗？

近幾年，透過垂直感染，神經(jīng)壞死病毒肆虐，石斑魚苗培育成為富貴險中求的行業(yè)。白身苗場購入受精卵后要經(jīng)過洗卵消毒，去除附著在卵殼上的細(xì)菌及病毒，阻絕感染病原，提高魚苗育成率。洗卵方式形形色色，育苗場各憑本事。

石斑魚為亞太地區(qū)最重要的養(yǎng)殖魚種之一，2007年FAO統(tǒng)計，全球養(yǎng)殖石斑年產(chǎn)量超過7.5萬噸，2009年臺灣石斑生產(chǎn)13,480公噸，魚苗年產(chǎn)量約5,000萬尾，石斑產(chǎn)業(yè)總產(chǎn)值接近臺幣50億元。

卵至白身苗存活0.3%以下

石斑魚養(yǎng)殖起源于香港，臺灣于 1972年在澎湖開始蓄養(yǎng)，至今已有三十年的養(yǎng)殖歷史，主要養(yǎng)殖種類有點帶石斑、馬拉巴石斑、龍膽石斑、老虎斑、芝麻斑、金錢斑、老鼠斑、七星斑等，其中以點帶石斑、馬拉巴石斑的產(chǎn)量最多。

臺灣的石斑魚苗養(yǎng)殖始自1982 年，魚卵源自野生種魚，在1984-1985年以室內(nèi)型態(tài)育成馬拉巴石斑寸苗上萬尾。1987年利用養(yǎng)殖的種魚，以室外型態(tài)育成近百萬尾魚苗，1995年生產(chǎn)約2,600萬尾。

1994年初，臺灣南部許多養(yǎng)殖場發(fā)現(xiàn)石斑魚苗在孵化兩周后大量死亡。水試所東港生技研究中心蘇惠美博士表示，經(jīng)由對病原體的研究分析，發(fā)現(xiàn)為感染病毒性神經(jīng)壞死癥。病變發(fā)生于各階段魚齡，感染程度以孵出十幾天之魚花最嚴(yán)重，發(fā)病快速且死亡率相當(dāng)高。

1996年因病毒性疾病蔓延，減為1,500萬尾。石斑苗受VNN的影響相當(dāng)嚴(yán)重，以2002年的石斑產(chǎn)量估算，種魚場約10余戶，年產(chǎn)約16-40公噸重卵，魚苗生產(chǎn)業(yè)者800余戶，生產(chǎn) 6,600萬尾寸苗，及3,300 萬尾二寸苗估算，卵至白身魚苗之活存率僅 0.1-0.3%，至二寸稚魚約0.15-0.05%。

臺灣的石斑魚養(yǎng)殖是分工精細(xì)的產(chǎn)業(yè)，主要分為四階段，第一階段為種魚場，第二階段為白身場，第三階段為2寸場，第四階段為養(yǎng)成場。種魚場養(yǎng)殖成熟的親魚，專門生產(chǎn)受精卵賣給下游的白身場，白身場將卵孵化養(yǎng)至7-8分以上，再由2寸場培養(yǎng)到2-3寸，最后由養(yǎng)成場接手養(yǎng)到1臺斤到1公斤的上市規(guī)格出售。

白身場購進(jìn)受精卵后，經(jīng)過洗卵、消毒、放卵，在低光度下約經(jīng)過3天，幼苗會靠卵黃發(fā)育成型，這期間不會進(jìn)食。接下來，有些會換池，有些不換池直接開始加水，期間的肥水濃度及微藻種類各自憑靠經(jīng)驗使用SS輪蟲、光合菌、氨基酸等當(dāng)作初期餌料，稍大后就使用橈腳、豐年蝦等。

病毒附著在卵殼表面

研究指出卵的消毒可降低將母魚所帶有之細(xì)菌及病毒傳播到不同魚苗場育苗池的風(fēng)險。以前臺灣大多數(shù)均未有這類操作，歐洲早期使用優(yōu)碘，隨后改用 glutaraldehyde，日本使用臭氧消毒法，而近年來各國采用臭氧消毒法者逐漸增加。歐美及日本等國家對鮭鱒類的研究指出，消毒可以有效的去除鮭鱒類魚卵卵膜上所附著的細(xì)菌與病毒，可以增加魚卵的孵化率與孵化后的活存率。

目前，國內(nèi)業(yè)者洗卵消毒的方法有碘劑、硫酸銅、二氧化氯、漂白水、雙氧水、臭氧、紫外線、電解海水、光觸媒等，甚至有“獨家配方”，業(yè)者通常會嘗試多種洗卵方式，在其中找出一種自己認(rèn)為最合用的。各種消毒劑及機(jī)械設(shè)備的使用成本有很大的差別，殺菌物質(zhì)的濃度、浸泡的時間、操作手法以及效果也有相當(dāng)大的差異，優(yōu)勝劣敗，并無定論，大家各憑本事。

“虹彩病毒主要是透過水平途徑傳染，神經(jīng)壞死病毒則是垂直感染，所以卵的消毒效果是值得期待的防治重點。比較恰當(dāng)?shù)南绰褧r間是眼胞期后，大約是受精后18小時�！敝苄庞永蠋熣f，卵殼有保護(hù)作用，如果表面有病毒，在開始孵化時，會侵入胚胎，造成胚胎死亡或魚苗畸型等。因此，表面沖洗干凈及適當(dāng)?shù)南�毒，可以提高孵化率及育成率，白身苗場一定要進(jìn)行卵的消毒�！坝邢淳陀行В�不管采用哪一種方式，有洗卵的、洗的時間及方式都對的話，魚苗育成率都絕對比沒有洗的來的好�！焙Ｑ蟠髮W(xué)石斑研究團(tuán)隊與水試所海水繁養(yǎng)殖研究中心合作，測試了不同孵化時期石斑魚卵對洗卵操作的耐受試驗。結(jié)果顯示，前期的囊胚與原腸期對人為操作的耐受性低，孵化率不到5成，之后的眼胞期、胚體形成后期及胚體抽動三期的孵化率則維持在80%以上。因此建議如果要進(jìn)行洗卵消毒，最好選擇在眼胞期之后開始施行，時間大約是受精后15-18小時之后。

成功大學(xué)楊惠郎教授指出，NNV主要附著在卵殼表面，使用適當(dāng)?shù)姆绞娇梢约右匀コ�，成功大學(xué)生物科技研究所采用物理與化學(xué)并用的方式處理�！安徽撚媚囊环N方式，最重要的是不要傷到受精卵，以免影響胚胎孵化�！�

洗卵各憑經(jīng)驗

高雄市林園區(qū)的石斑魚繁殖業(yè)者林增先生的洗卵方式是以奈米銀產(chǎn)品10ppm處理15分鐘，結(jié)果顯示孵化率及魚苗育成率都較高，洗卵前卵殼所帶的病毒和海洋弧菌也都能去除。過去他也曾使用臭氧海水對石斑受精卵洗卵1分鐘，能殺死NNV，孵化率也可以。但是臭氧處理育苗池水要注意溴氧化物的殘留，不然對仔魚可能產(chǎn)生不良影響，然而奈米銀就沒有這種后遺癥。

以斯帖公司許經(jīng)理表示，他們委托臺灣海洋大學(xué)水產(chǎn)品產(chǎn)銷履歷驗證暨檢驗中心在2011年6月以25ppm濃度奈米銀產(chǎn)品處理黑鯛受精卵10分鐘也不會對孵化率造成影響，可說是相當(dāng)優(yōu)良的洗卵殺菌劑。

“有研究指出，水體中病原菌達(dá)103 CFU/mL即可讓水生動物致病，而病原菌達(dá)105 CFU/mL則表示水質(zhì)已相當(dāng)惡劣，海洋大學(xué)水產(chǎn)品檢驗中心在2011年7月實驗結(jié)果證實以8ppm奈米銀產(chǎn)品在10分鐘內(nèi)能有效的殺死103 CFU/mL的海洋弧菌，30分鐘內(nèi)能有效殺死高達(dá)105 CFU/mL之海洋弧菌�！币运固�公司許經(jīng)理說。

水試所以二氧化氯處理10分鐘，探討其對孵化前期胚體卵之耐性試驗，顯示1ppm以內(nèi)的二氧化氯為其安全濃度，建議育苗用水之消毒可以參考使用。

水試所方面表示，二氧化氯會受pH值、水溫、懸浮物質(zhì)及有機(jī)物含量的影響，使用時應(yīng)依處理后至放卵時間適度調(diào)整，消毒殺菌后宜充分曝氣以去除殘氯。還有殘氯之揮發(fā)及毒性與環(huán)境溫度有關(guān)，放卵前最好先以受精卵或魚花測試，確定安全沒有疑慮后再下卵。

通常業(yè)者會嘗試各種洗卵的方式，最后選擇自己感覺最合用藥劑、濃度與時間。有業(yè)者使用消毒藥性較強的硫酸銅0.1ppm濃度浸泡10秒鐘處理，業(yè)者認(rèn)為成本便宜效果又好。

海洋大學(xué)周信佑老師的學(xué)生周佳璇曾與水試所海水繁養(yǎng)殖研究中心合作，在2005年10月至2006年4月進(jìn)行了石斑種苗生產(chǎn)期之虹彩病毒防除對策研究。研究結(jié)果顯示，碘消毒處理的效果最佳，相較于控制組，魚苗活存可提高約20%-30%。因此建議在進(jìn)行石斑魚種苗時期的虹彩病毒防除時，以50ppm碘處理眼胞期的受精卵10分鐘后，能提高其孵化率及活存率。不過，使用化學(xué)藥劑，有成本及安全性方面的因素需加以考慮。

臭氧洗卵0.3ppm1分鐘

水試所東港生技研究中心在四次石斑魚卵的洗卵孵化試驗中，直接將魚卵投入飼育槽孵化，所孵出的魚苗數(shù)目極少，且在槽底部發(fā)現(xiàn)大量的死卵，估算其孵化率則尚不及1成。當(dāng)以去TRO的臭氧處理水洗卵的石斑魚卵孵化率為100%，顯示洗卵孵化大大改善孵化率。

水試所東港生技研究中心蘇惠美博士表示，該中心以0.1ppm TRO臭氧水處理1-10分鐘，孵化率都大于90%，但是魚苗活存率隨浸泡時間增加而降低。以0.5ppm消毒則孵化率明顯偏低，且有68%出現(xiàn)延遲孵化的現(xiàn)象。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.3ppm消毒1分鐘，為合適的操作方法。臭氧處理水洗卵與UV比較，孵化率高出約 6-11%�！皩嶒炑芯恳舶l(fā)現(xiàn)，石斑魚卵開始孵出時水中的總生菌量與弧菌量增加最多，孵化完畢時，以較大的進(jìn)流水量洗卵，總生菌數(shù)有減少的趨勢；2-3L/分鐘進(jìn)流水量，水中的總生菌量則成小幅度增加�！�

高雄林園的白身苗業(yè)者阿國也是用臭氧洗卵。他說，學(xué)術(shù)研究建議是用0.3ppm濃度臭氧浸泡1分鐘，他們則是采0.2ppm 90秒處理，浸泡分2次，每次45秒�！懊看芜M(jìn)卵后，先用干凈海水徹底沖洗一遍，再用臭氧處理過的海水浸泡45秒。沖洗、浸泡步驟再重復(fù)做一次以后才將卵放入育苗池孵化�！卑�國說，他們用臭氧的方式育苗成績相當(dāng)穩(wěn)定。2011年11月剛遷來林園后感覺水質(zhì)條件稍微差了些，第一批1公斤點帶石斑卵只培育出2萬尾左右的白身苗。這批苗因場內(nèi)池子都還空著，就留下來以到2寸再處理。

日本奄美栽培漁業(yè)中心的研究結(jié)果也顯示，使用的臭氧海水，對黑鮪受精卵洗卵1分鐘，即能殺死NNV。黑鮪VNN主要為垂直感染造成，如果未能排除此種垂直感染的話，就無法制止VNN的發(fā)生。目前的技術(shù)并無法排除來自黑鮪親魚的病毒，因為在受精卵上附帶有病毒。

電解海水與光觸媒未來可期待

海水電解后會產(chǎn)生氧化劑，可作為海水殺菌之用。日本奄美栽培漁業(yè)中心用電解海水來進(jìn)行黑鮪受精卵的消毒。電解海水因水中含有氧化劑的殘留，會對仔魚產(chǎn)生不良影響，故不能直接作為飼養(yǎng)水使用，需以活性炭處理除去殘留的氧化劑后，才可作為養(yǎng)殖用水。

周信佑老師表示，電解海水是很好的一種處理水做為洗卵的方式，但是缺點是設(shè)備的制造成本較高，在日本要日幣數(shù)十萬到百萬元，視處理海水量的機(jī)型大小而定，如果直接自日本引進(jìn)臺灣的話也不會太便宜，目前似乎還沒有引進(jìn)做水產(chǎn)養(yǎng)殖之用。

另一項海大的研發(fā)成果是光觸媒技術(shù)�！斑@項技術(shù)如果能落實到商業(yè)化生產(chǎn)，會是便宜又有效的消毒方式，未來發(fā)展?jié)摿�無窮�！敝芾蠋熣f，今年將向政府有關(guān)單位提產(chǎn)學(xué)合作計劃，通過后才能制造原型，并進(jìn)行設(shè)備的測試。現(xiàn)今的光觸媒的光源仍是利用紫外線殺菌，而臺灣海洋大學(xué)石斑魚研究團(tuán)隊已研發(fā)用可見光就可以殺菌的技術(shù)。
周老師也指出，他們有電解海水及光觸媒的研發(fā)成果，但是在制造業(yè)界的人脈及信息不足，還沒找到合作的廠商，將研發(fā)成果商品化，歡迎有興趣的業(yè)者與臺灣海洋大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖系聯(lián)系，做進(jìn)一步的洽談。

魚苗育成率牽涉因素多

事實上，洗卵僅僅是育苗業(yè)者進(jìn)卵后一連串操作中的第一個步驟，魚苗的育成率的高低，還牽涉到：（1）水質(zhì)環(huán)境；（2）孵化管理；（3）初次攝食時間掌控；（4）初期餌料（嗜口性、大小、營養(yǎng)）；（5）餌料來源；（6）餌料清洗及消毒；（7）投餌量之掌控；(8)水質(zhì)監(jiān)測與管理；（9）NH4+-N及NO2--N 之去除；（10）魚苗分級與預(yù)防殘食。

高雄林園的白身苗場業(yè)者阿ㄆ說，繁殖魚苗的前置作業(yè)很重要，會影響放養(yǎng)后魚苗孵化的成功率。海水的處理增加海水的硬度，大量曝氣3天以上，海水的比重20-25，溫度，pH值7.8。下卵后加溫棒要關(guān)閉，第3天一定要下輪蟲，光照要夠。魚苗黑肚后要馬上有餌料可食，不然一封口魚苗就不食餌了，過料過程會比較差。第18天開始收翅也是關(guān)鍵，營養(yǎng)、含氧量都要夠。

種魚業(yè)者黃明忠認(rèn)為石斑魚苗育成率的低下，主要和氣候有關(guān)，天氣忽冷忽熱、陰晴變化不定，孵化成績一定差。業(yè)者邱宏茂也說，溫差大對育苗非常不利，點帶石斑卵全年都有生產(chǎn)，育苗業(yè)者大可不必?fù)岊^香冒風(fēng)險，不妨等氣候穩(wěn)定了再出手�！　�

周信佑老師最后也強調(diào)，光是依賴養(yǎng)殖一個環(huán)節(jié)是無法解決石斑育苗困難的問題。因此，海洋大學(xué)的石斑魚研究是由一個含括了養(yǎng)殖、病理、食品、環(huán)境、機(jī)械與機(jī)電等等科系的團(tuán)隊所組成，希望學(xué)術(shù)上的研究成果能為產(chǎn)業(yè)做出一些幫助。

致謝

本期特別報導(dǎo)蒙臺灣海洋大學(xué)周信佑老師、東港生技研究中心蘇惠美博士、成功大學(xué)楊惠郎教授以及業(yè)者高瑞國、曹俊清、吳培佑，林增、阿ㄆ、黃明忠、邱宏茂、小郭等熱心提供數(shù)據(jù)、圖片及協(xié)助采訪，特此致謝。

文/圖 《養(yǎng)魚世界》 鄭石勤