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摘要: 以平板計(jì)數(shù)法, 研究了不同濃度枯草芽孢桿菌對泥蚶及養(yǎng)殖底泥中細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響。試驗(yàn)分為1 × 10^6 , 5 × 10^6 和10× 10^6 CFU/L 3 個(gè)濃度試驗(yàn)組和對照組, 試驗(yàn)共進(jìn)行28 d, 在第0、7、14、21 和28 天時(shí)采底泥和泥蚶, 采用平板計(jì)數(shù)法檢測細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)。結(jié)果顯示, 在投施枯草芽孢桿菌后7 d 內(nèi), 養(yǎng)殖底泥和泥蚶體內(nèi)細(xì)菌總數(shù)均呈明顯上升趨勢, 7~ 28 d內(nèi)緩慢下降, 但差異不顯著; 投施枯草芽孢桿菌后, 各試驗(yàn)組底泥和泥蚶體內(nèi)弧菌總數(shù)顯著低于對照組, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L 試驗(yàn)組弧菌總數(shù)顯著低于1 × 10^6 CFU/L 試驗(yàn)組。結(jié)果表明枯草芽孢桿菌具有抑制弧菌增殖的作用, 枯草芽孢桿菌可應(yīng)用于泥蚶池塘養(yǎng)殖。

近幾年, 隨著中國灘涂和圍塘貝類養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大, 在每年溫度上升的4、5月份和繁殖后的9、10月份, 主要灘涂養(yǎng)殖貝類易發(fā)生病害死亡, 在浙江沿海養(yǎng)殖的泥蚶、青蛤、縊蟶和文蛤都發(fā)生不同程度的病害死亡,嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖效益, 研究工作者們正在從不同研究角度探索可能的解決對策。

枯草芽孢桿菌是目前廣泛應(yīng)用的一類益生菌, 可改善養(yǎng)殖水體環(huán)境質(zhì)量和維持養(yǎng)殖動(dòng)物消化道微生境的生態(tài)平衡, 提高養(yǎng)殖動(dòng)物免疫能力, 以及促進(jìn)動(dòng)物生長等, 且無污染、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性, 無水產(chǎn)品質(zhì)量安全隱患, 具有廣泛的應(yīng)用前景。近年來, 國內(nèi)外學(xué)者對枯草芽孢桿菌的分離和培養(yǎng)條件優(yōu)化、枯草芽孢桿菌的免疫促進(jìn)作用和環(huán)境改良, 以及與病原微生物的對峙試驗(yàn)都進(jìn)行了大量的研究工作, 而上述研究大都集中在養(yǎng)殖魚、蝦方面, 而關(guān)于養(yǎng)殖貝類研究報(bào)道甚少,對泥蚶的研究還未見報(bào)道。本研究通過在泥蚶養(yǎng)殖過程中投施不同濃度的枯草芽孢桿菌, 研究不同濃度的枯草芽孢桿菌對泥蚶及養(yǎng)殖底泥中細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響, 探求芽孢桿菌的抑菌效果, 以期為泥蚶養(yǎng)殖環(huán)境的改良和泥蚶產(chǎn)品質(zhì)量控制提供參考數(shù)據(jù)。

結(jié)果顯示, 投喂枯草芽孢桿菌后7 d 內(nèi),各試驗(yàn)組中的底泥和泥蚶體內(nèi)細(xì)菌總數(shù)( 包括芽孢桿菌) 不斷升高, 呈現(xiàn)相似的增長趨勢, 底泥中細(xì)菌總數(shù)最高峰達(dá)到了2.51 × 10^13 CFU/g, 在7 ~ 14 d后顯著降低, 細(xì)菌總數(shù)基本保持穩(wěn)定; 在14~ 28 d 內(nèi)基本保持平衡, 14、21 和28 d 時(shí), 各試驗(yàn)組底泥和泥蚶體內(nèi)細(xì)菌總數(shù)都顯著低于對照組水平。

在投喂芽孢桿菌的前7 d 內(nèi), 3 個(gè)試驗(yàn)組中的底泥和體內(nèi)弧菌總數(shù)顯著降低, 呈現(xiàn)相似的下降趨勢; 投施枯草芽孢桿菌后, 各試驗(yàn)組底泥和泥蚶體內(nèi)弧菌總數(shù)顯著低于對照組, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L試驗(yàn)組弧菌總數(shù)顯著低于1 × 10^6 CFU/L 試驗(yàn)組。28 d 時(shí), 10 × 106 CFU/L 試驗(yàn)組底泥和泥蚶體內(nèi)的弧菌生長達(dá)到最小值, 底泥為1 × 10^8 CFU/g, 泥蚶體內(nèi)為63 CFU/g。

枯草芽孢桿菌可作為一種水質(zhì)調(diào)節(jié)劑, 凈化養(yǎng)殖水環(huán)境, 枯草芽孢桿菌降低養(yǎng)殖水體氨氮、亞硝酸鹽和COD 等方面的研究已有報(bào)道, 丁雷等報(bào)道芽孢菌能改善養(yǎng)魚水質(zhì); 劉穎等報(bào)道在養(yǎng)殖水體中加入特定的芽孢桿菌及酵母菌, 能使其定殖于養(yǎng)殖水體, 生長繁殖后測定各項(xiàng)水質(zhì)指標(biāo), 證明其能迅速而有效地降低水中亞硝酸鹽的含量, 并對水中溶氧的影響較小, 能夠有效地改善養(yǎng)殖水體的水質(zhì)狀況。同時(shí), 枯草芽孢桿菌作為益生菌, 對弧菌等條件致病菌具有明顯的抑制作用。王芳等報(bào)道了枯草芽孢桿菌中富含抗菌成分, 并提純了其抗菌活性成分; 黃汝添等研究了枯草芽孢桿菌Bs-1抗菌物質(zhì)產(chǎn)生的特點(diǎn)和對溶藻弧菌的拮抗能力, 結(jié)果表明Bs-1 產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)能抑制多種分離自養(yǎng)殖大海馬腸道和海水的弧菌如溶藻弧菌的生長; 每升海水中加入4mL培養(yǎng)液( 4×10^6 CFU/mL) 已能達(dá)到較好的抑菌效果。伏傳永報(bào)道枯草芽孢桿菌對刺參病原菌具有很強(qiáng)的拮抗作用; 陳莉等采用平板對峙法測定枯草芽孢桿菌N1729 對棉花病原菌的抑菌效果, 結(jié)果表明該菌對棉花立枯病菌、枯萎病菌和黃萎病菌均具有較強(qiáng)的抑菌作用, 其中對立枯病菌的抑制率為45.7%, 該菌無細(xì)胞濾液對以上3 種病原菌具有一定的抑菌作用。本研究結(jié)果表明, 投施枯草芽孢桿菌28 d, 試驗(yàn)組細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)顯著低于對照組水平, 顯示出了枯草芽孢桿菌對海水中的弧菌具有良好的拮抗作用, 與上述的研究觀點(diǎn)一致。證實(shí)了枯草芽孢桿菌對底泥和泥蚶體內(nèi)一些細(xì)菌和條件性致病菌弧菌具有拮抗作用。

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